%0 Thesis %9 THE : Thèses %A Kouassi, Koffi Nazaire %T Etude du génome des densovirus de lépidoptères ravageurs de cultures : Casphalia extranea en Côte d'Ivoire et Diatraea saccharalis au Brésil, application au diagnostic par sonde nucléique %C Montpellier %D 1993 %L fdi:38330 %G FRE %I Université de Montpellier 2 %K LEPIDOPTERE RAVAGEUR ; VIRUS ENTOMOPATHOGENE ; ADN ; BIOLOGIE MOLECULAIRE ; DIAGNOSTIC ; VIROSE ; LUTTE BIOLOGIQUE %K DENSIVIRUS ; CLONAGE ; GENOME ; CULTURE CELLULAIRE ; SONDE NUCLEIQUE %K COTE D'IVOIRE ; BRESIL %P 165 %U https://www.documentation.ird.fr/hor/fdi:38330 %> https://horizon.documentation.ird.fr/exl-doc/pleins_textes/doc34-01/38330.pdf %W Horizon (IRD) %X Nous avons analysé le génome des densovirus de #C. extranea$ (#Ce$DNV) et de #D. saccharalis$ (#Ds$DNV). Les tailles de ces génomes ont été estimées à 4,9 kb pour le Ce DNV et à 5,95 kb pour celui du #Ds$DNV. Vingt sites de restriction ont été cartographiés sur le génome du #Ce$DNV et 41 sites sur celui du #Ds$DNV. La séquence du génome du #Ce$DNV correspondant aux fragments #Hind$III A et D (approx. 50 % du génome) a été clonée dans le plasmide pEMBL 19+. Le plasmide correspondant, pCeHindIIIA+D, nous a servi à la mise au point d'une sonde nucléique. La séquence quasi-complète du génome du Ds DNV a été clonée dans le même vecteur générant le plasmide pDst50. Ce plasmide transfecté dans la lignée cellulaire Px de #Plutella xylostella$ a conduit à une infection typique avec production de virions. Du fait d'analogies entre les cartes de restriction des génomes du #Ds$DNV et du #Jc$DNV, des génomes chimères ont été construits par substitution réciproque des séquences internes codantes de l'ADN du #Jc$DNV cloné (pBRJH) et celles du pDst50. L'analyse des virions chimères montre que les répétitions terminales inversées du #Ds$DNV peuvent servir d'origine de réplication pour les séquences codantes du #Jc$DNV. Cet échange de séquence ne modifie pas la spécificité d'hôte. Une méthode de diagnostic de la virose de #C. extranea$ par sonde nucléique froide a été mise au point et appliquée à l'analyse de l'état sanitaire des populations larvaires récoltées au cours de deux prélèvements à deux semaines d'intervalle (Septembre-Octobre 1991) dans les plantations de palmiers à huile d'Eloka (Côte d'Ivoire). La présence du virus a été détectée après dépôt de broyat larvaire sur membrane puis hybridation avec la sonde ADN viral cloné (pCeHindIIIA+D). L'analyse statistique des résultats effectuée par la méthode des variables régionalisées a montré que la distribution des larves et la dissémination de la virose dans la plantation se faisaient au hasard avec une évolution spatio-temporelle relativement rapide de la virose dans la parcelle choisie. (Résumé d'auteur) %$ 076RAVPLA08