@phdthesis{PAR00007355,
  title = {{I}mplication d'une subtilase dans les {\'e}tapes pr{\'e}coces des symbioses actinorhiziennes},
  author = {{S}vistoonoff, {S}ergio},
  editor = {},
  language = {{FRE}},
  abstract = {{L}es plantes actinorhiziennes sont des non l{\'e}gumineuses appartenant {\`a} 8 familles d'angiospermes qui peuvent {\'e}tablir une symbiose fixatrice d'azote avec l'actinomyc{\`e}te du sol {F}rankia. {C}ette interaction aboutit {\`a} la formation de nodules au niveau du syst{\`e}me racinaire de la plante. {P}armi les g{\`e}nes qui interviennent au cours des {\'e}tapes pr{\'e}coces de la symbiose figure {C}g12, un g{\`e}ne isol{\'e} chez l'arbre actinorhizien {C}asuarina glauca qui code une prot{\'e}ase {\`a} s{\'e}rine de la famille des subtilisines (=subtilase). {L}'objectif de ce travail est la poursuite de la caract{\'e}risation de ce g{\`e}ne {\`a} travers 4 approches :(1) {U}ne {\'e}tude d{\'e}taill{\'e}e du profil d'expression de {C}g12 a {\'e}t{\'e} r{\'e}alis{\'e}e grâce {\`a} l'utilisation de {C}asuarinac{\'e}es transg{\'e}niques contenant des fusions transcriptionelles entre le promoteur de {C}g12 et des g{\`e}nes rapporteurs. {C}ette analyse a permis de montrer que l'expression de {C}g12 est sp{\'e}cifiquement li{\'e}e {\`a} l'infection des cellules par {F}rankia et qu'elle d{\'e}bute d{\`e}s les premi{\`e}res {\'e}tapes de la symbiose, quand {F}rankia p{\'e}n{\`e}tre dans des poils absorbants d{\'e}form{\'e}s. (2) {L}a prot{\'e}ine {CG}12 a {\'e}t{\'e} mise en {\'e}vidence dans des extraits prot{\'e}iques de {C}. glauca en utilisant des anticorps anti-{CG}12. {C}es anticorps ont {\'e}galement {\'e}t{\'e} utilis{\'e}s dans des exp{\'e}riences d'immunolocalisation, ce qui nous a permis de montrer que {CG}12 se retrouve dans le compartiment extracellulaire, au niveau des parois et du mat{\'e}riel polysaccharidique qui entoure {F}rankia. (3) {N}ous avons introduit les fusions transcriptionelles {C}g12-g{\`e}ne rapporteur dans la plante mod{\`e}le {A}rabidopsis thaliana afin d'analyser les voies de transduction impliqu{\'e}es dans l'expression de {C}g12. {C}ependant aucune expression des g{\`e}nes rapporteurs n'a pu {\^e}tre d{\'e}tect{\'e}e au cours du d{\'e}veloppement et en r{\'e}ponse {\`a} des traitements hormonaux. {N}ous avons {\'e}galement utilis{\'e} {A}rabidopsis afin de mieux comprendre le r{\^o}le d'{A}ra12, un g{\`e}ne de subtilase proche de {C}g12, dont nous avons analys{\'e} le profil d'expression chez {A}rabidopsis.(4) {N}ous avons {\'e}tudi{\'e} l'implication de subtilases dans la symbiose fixatrice d'azote entre la l{\'e}gumineuse {M}edicago truncatula et {S}inorhizobium meliloti. {P}our cela nous avons analys{\'e} le profil d'expression des g{\`e}nes rapporteurs plac{\'e}s sous le contr{\^o}le du promoteur de {C}g12 dans des plantes transg{\'e}niques de {M}. truncatula. {L}a conservation du profil d'expression de {C}g12 chez {M}. truncatula sugg{\`e}re l'existence d'une voie de transduction ind{\'e}pendante de celle qui est activ{\'e}e par les facteurs {N}od. {C}ette voie de transduction est activ{\'e}e dans les deux syst{\`e}mes symbiotiques en r{\'e}ponse {\`a} l'infection par les bact{\'e}ries. {N}ous avons ensuite analys{\'e} le profil d'expression de plusieurs g{\`e}nes de subtilases trouv{\'e}s dans les banques de s{\'e}quences de {M}. truncatula. {T}rois de ces g{\`e}nes sp{\'e}cifiquement exprim{\'e}s dans les nodules pourraient {\^e}tre des orthologues de {C}g12 chez {M}. truncatula.},
  keywords = {symbiose ; actinorrhize ; subtilase ; signalisation ; cg12 ; {C}asuarina ; {F}rankia ; biologie mol{\'e}culaire ; marqueur ; infection},
  address = {{M}ontpellier},
  publisher = {{USTL}},
  pages = {67  multigr.},
  year = {2003},
  URL = {https://www.documentation.ird.fr/hor/{PAR}00007355},
}